‘壹’ 普通PCR中一步法、两步法、三步法的定义、区别、通途以及具体的设置条件
一步法,使用特殊引物,全程只设置一个温度即可完成扩增。这种特殊引物有专利。
二步法即循环扩增中设置2个步骤,这个方法主要扩增短片段,一个是95度变性,另一个是退火与扩增的温度,一般设置在55~60之间,当然也有例外。
三步法就是平常见到的方法,扩增循环有三步,变性,退火,延伸。
‘贰’ 一步法和两步法RT-PCR的根本区别
博凌科为-为你解答:两步法rt-pcr比较
常见,在使用一个样品检测多个mrna时比较有用。然而一步法rt-pcr具有其他优点。一步法rt-pcr在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污
染,因为在cdna合成和扩增之间不需要打开管盖。一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总rna,这是因为整个cdna样品都被扩增。
对于成功的一步法rt-pcr,
一般使用反义的基因特异性引物起始cdna合成。
一步法
两步法
起始第一链cdna合成使用:
起始第一链合成使用
oligo(dt)
gsp引物
随机六聚体
gsp引物
优点
优点
灵活
方便
引物选择
扩增酶同逆转录酶预先混合
扩增酶的选择
转管步骤少,减少污染可能性
困难rt-pcr的优化能力
高灵敏度
同
platinum酶结合提高特异性
适用于大量样品分析
同platinumpfxtaqdna聚合酶结合提高忠实性
适用于定量pcr
适用于在单个样品中检测几个mrna
‘叁’ yolo算法是什么
yolo算法是一种目标检测算法。目标检测任务的目标是找到图像中的所有感兴趣区域,并确定这些区域的位置和类别概率。目标检测领域的深度学习方法主要分为两大类两阶段式(Two-stage)目标检测算法和单阶段式(One-stage)目标检测算法。两阶段式是先由算法生成一系列候选边界框作为样本,然后再通过卷积神经网络分类这些样本。

yolo算法原理
因为它采用深层卷积神经网络,吸收了当前很多经典卷积神经网络架构的优秀思想,在位置检测和对象的识别方面,性能达到最优(准确率非常高的情况下还能达到实时检测)。因为作者还将代码开源了。真心为作者这种大公无私的心胸点赞。
美中不足的是虽然将代码开源,但是在论文介绍架构原理的时候比较模糊,特别是对一些重要改进,基本上是一笔带过。现在在网络上有很多关于YOLO原理的讲解。
‘肆’ 人工神经网络目标检测识别算法分类
1、基于区域建议的目标检测和识别算法
2、基于回归的目标检测和识别算法
3、基于收索的目标检测和识别算法
‘伍’ RT-PCR中用一步法还是两步法好一些
一步法RT-PCR在处理大量样品时易于操作,有助于减少残余污染,因为在cDNA合成和扩增之间不需要打开管盖.一步法可以得到更高的灵敏度,最低可以达到0.1pg总RNA,这是因为整个cDNA样品都被扩增.对于成功的一步法RT-PCR,一般使用反义的基因特异性引物起始cDNA合成.
‘陆’ 实时荧光定量PCR,是一步法好还是两步法好
一步法从方便性上来说肯定是更方便的,但是有时候一步法往往达不到两步法那么好的效果,所以具体还是看你的需求。
‘柒’ 以往一步法的试验方法(如TP,两对半)都改为了两步法,请说明原因
主要是为了避免钩状效应即HOOK效应导致一步法测抗原或抗体出现假阴性的现象。
‘捌’ 目标检测算法是什么
目标检测算法是先通过训练集学习一个分类器,然后在测试图像中以不同scale的窗口滑动扫描整个图像;每次扫描做一下分类,判断一下当前的这个窗口是否为要检测的目标。检测算法的核心是分类,分类的核心一个是用什么特征,一个是用哪种分类器。

(8)目标检测算法一步法和两步法扩展阅读:
目标检测算法可以分为:
1、背景建模法,包含时间平均模型、混合高斯模型、动态纹理背景、PCA模型、时一空联合分布背景模型
2、点检测法,包含Moravec检测器、Harris检测器 、仿射不变点检测、S IFT
3、图像分割法,包含Mean Shift方法 、Graph-cut方法、Active Contours方法
4、聚类分析法,包含支持向量机、神经网络、Adaptive Boosting
5、运动矢量场法,包含基于运动矢量场的方法