‘壹’ 荧光检测方法
荧光检测是一种自然发光反应，通过荧光素酶与 ATP进行反应，可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣，在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量，并以数字形式予以表示，在1975年首先被应用到食品工业中，在1985年在化妆品制造业中得到应用。
荧光定量：采用国际主流的荧光定量PCR技术，迅速提升技术水平。
结果稳定：检测结果CV值与进口全自动PCR仪接近，具有自检功能，避免错误数据的输出。
封闭操作：全部检测过程均为闭管操作，于反应管处检测荧光，有效防止污染，解决PCR技术中最棘手之难题。
准确定量：满足临床对量化的需求，定量荡围宽，可涵盖大部分病原微生物，自动曲线拟合。
灵敏度高：利用光谱信号灵敏性的优势，有效提高检测灵敏度。
安全：全程无毒检测。
操作简便：省去后处理的烦琐过程。
直接打印：直接打印结果，无须记录大量数据。
升级版：FS1000有与电脑连接的数传输口，可以连接电脑，根据用户需要提供先进分析软件，全面分析实验数据。（电脑和打印机选配件）
故障率低：维护非常简单。
节约资源：可利用现用PCR扩增仪，最大限度节约资源。
‘贰’ 免疫荧光染色中，细胞固定后，不进行封闭处理，是不是不好
这个没有绝对的.取决于你的试验方法和目的.一般来说,固定后,把样本再转移到保存液中,可以大大延长保存的时间. 为了保护抗原表位,建议你使用新鲜配置的多聚甲醛来固定.固定后立刻转移到5%BSA的PBS溶液中（最好放防腐剂）,可以在4度保存一段时间. 当然,样本长时间保存,肯定对结果会有不好影响.至于影响的大小,你要做一个时间曲线来证明.以后就心中有数了. 还有一点要注意的是,抗体对抗原表位的识别.有些抗体只能识别未固定的表位,有些可以识别固定后的,有些只能识别变性的肽链.购买的时候也要特别注意.
‘叁’ 基质胶上怎样做细胞免疫荧光试验
免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。
操作步骤：
1.细胞铺板：将细胞以合适的密度（注意：一般情况下，细胞密度不要太高，不要叠在一起，否则干扰最后拍片）接种于玻底培养皿（b小编用的是confocal皿：如下图）中，进行转染，加药诱导等实验处理。
2.固定：吸去培养基，PBS清洗2次。3min/次。加4%的多聚甲醛(用1X的PBS稀释配制)，室温固定20-30min。PBS清洗3次，3-5min/次。吸干PBS。
3.通透：加0.3%-0.5%Triton X-100(用1X的PBS稀释配制)，室温通透20-30min（如果是检测细胞膜上表达的抗原，则省略此步骤）。PBS清洗3次，3-5min/次。吸干PBS。
4.封闭：在玻底培养皿中滴加正常血清或5%BSA封闭液，室温封闭30-60min；
5.孵育一抗：吸掉封闭液，不用PBS洗，在每个玻底培养皿中滴加足够量的稀释好的一抗，并放入湿盒，4℃孵育过夜；
注意：一般抗体稀释比约为1:50-1:100。正常玻底皿培养皿每皿加50-100ml抗体稀释液（至少要能恰好浸没住底部细胞）。还有必须保证湿盒有水，以免干片。一抗建议回收，放-20℃或-80℃保存。若是检测多个指标，所用一抗必须是不同来源。
6.孵育二抗：回收一抗，加0.1%的PBST 清洗3次，3-5min/次。吸干PBST。滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中20-37℃孵育1h，PBST浸洗3次，每次3min。
注意：该步骤及之后步骤都需要避光操作。二抗稀释倍数约为1:100-1:200。
7.复染核：滴加DAPI或Hochest孵育5-10min（避光操作），对样品进行染核，PBST 浸洗4次，每次5min。
8.拍片：在共聚焦显微镜或荧光显微镜下观察采集图像。
‘肆’ X射线荧光吸收光谱图中，吸收限的产生原理
X射线荧光及其分析原理
1、X射线
X射线是一种电磁波，根据波粒二相性原理，X射线也是一种粒子，其每个粒子根据下列公式可以找到其能量和波长的一一对应关系。
E＝hv=h c/l
式中h为普朗克常数，v为频率，c为光速，l为波长。
可见其能量在0.1 ~100（kev）之间。
g X 紫 可 红 微 短 长
射 射 外 见
线 线 线 光 外 波 波 波
波长
X射线的产生有几种
高速电子轰击物质，产生韧致辐射和标识辐射。其产生的韧致辐射的X射线的能量取决于电子的能量，是一个连续的分布。而标识辐射是一种能量只与其靶材有关的X射线。
常见的X射线光管就是采用的这种原理。其X射线能量分布如下：
强度
能量
2、同位素X射线源。
同位素在衰变过程中，其原子核释放的能量，被原子的内层电子吸收，吸收后跳出内层轨道，形成内层轨道空位。但由于内层轨道的能级很低,外层电子前来补充，由于外层电子的能量较高，跳到内层后，会释放出光能来，这种能就是X射线。这就是我们常见的同位素X射线源。由于电子的能级是量化的，故释放的射线的能量也是量化的,而不是连续的。
强度
能量
3、同步辐射源。
电子在同步加速器中运动，作园周运动，有一个恒定的加速度，电子在加速运动时，会释放出X射线，所以用这种方法得到的X射线叫同步辐射X射线。
2、X射线荧光
实际上，有很多办法能产生X射线，例如用质子、a射线、l射线等打在物质上，都可以产生X射线，而人们通常把X射线照射在物质上而产生的次级X射线叫X射线荧光（X-Ray Fluorescence），而把用来照射的X射线叫原级X射线。所以X射线荧光仍是X射线。
3、特征X射线
有人会问，为什么可以用X射线来分析物质的成分呢？这些都归功于特征X射线。
早在用电子轰击阳极靶而产生X射线时，人们就发现，有几个强度很高的X射线，其能量并没有随加速电子用的高压变化，而且不同元素的靶材，其特殊的X射线的能量也不一样，人们把它称为特征X射线，它是每种元素所特有的。莫塞莱（Moseley）发现了X射线能量与原子序数的关系。
E?（z-s）?
E是特征X射线能量，Z是原子序数，s是修正因子。
这就是着名的莫塞莱定律， 它开辟了X射线分析在元素分析中的应用。
为什么会有特征X射线的出现呢？这可以从玻尔的原子结构理论找到答案。原子中的电子都在一个个电子轨道上运行，而每个轨道的能量都是一定的，叫能级。内层轨道能级较低，外层轨道能级较高，当内层的电子受到激发（激发源可以是电子、质子、a 粒子、l射线、X射线等），有足够的能量跳出内层轨道，那么，较外层的电子跃迁到内层的轨道进行补充，由于是从高能级上跳往低能级上，所以会释放出能量，其能量以光的形式放出，这就是特征X射线。
Kb
Ka
原子核
K L M
层 层 层 La
M层
La 较高能级
L层
Ka Kb
K层 低能级
特征X射线依跃迁的不同而分别称为Ka、Kb、La、Lb……
4、X射线对物质的作用
物质特征X射线
散射
X射线 结果 光电子
物质 其它作用
光电子效应是我们探测X射线的基础。散射则会导致本底的出现，而特征X射线则是我们作为元素分析的基础。
5、X射线荧光分析
X射线用于元素分析，是一种新的分析技术，但在经过二十多年的探索以后，现在已完全成熟，已成为一种广泛应用于冶金、地质、有色、建材、商检、环保、卫生等各个领域的新的分析技术。
每个元素的特征X射线的强度除与激发源的能量和强度有关外，还与这种元素在样品中的含量有关，用下式表示
Ii =f（C1,C2…Ci…)
i=1,2…
Ii是样品中第i个元素的特征X射线的强度,C1,C2,……是样品中各个元素的含量.。
反过来，根据各元素的特征X射线的强度，也可以获得各元素的含量信息。这就是X射线荧光分析的基本原理。
有人会问，又为什么要用X 荧光分析呢？为什么不用原级的X射线呢，因为X光管的阳极物质也会发出特征X射线呀？
不错，早年曾使用过这种方法。但这种方法的弊病也是显而易见的。因为X光管中是要抽真空的，放样品不方便。其次，由于有很强的连续谱作为背景，所以测量的灵敏度很有限。如果采用荧光方法，由于特征X射线的发射是各向同性的，而散射则是有方向性的，所以可以选择探测角度，尽量避开散射本底，从而大大提高了测量灵敏度，其次，放样品也变得很简单了。所以，目前都采用了X荧光方法。
6、X射线荧光分析法与其它分析方法的比较
对样品进行成份分析有很多方法，例如，中子活化、原子发射光谱、原子吸收光谱、质谱、极谱以及传统的化学分析方法。那么，X射线荧光分析法有哪 些特点呢？
优点：
（a）分析速度高。测定用时与测定精密度有关，但一般都很短，2～5分钟就可以测完样品中的全部待测元素。
（b）X射线荧光光谱跟样品的化学结合状态无关，而且跟固体、粉末、液体及晶质、非晶质等物质的状态也基本上没有关系。（气体密封在容器内也可分析）但是在高分辨率的精密测定中却可看到有波长变化等现象。特别是在超软X射线范围内，这种效应更为显着。波长变化用于化学位的测定。
（c）非破坏分析。在测定中不会引起化学状态的改变，也不会出现试样飞散现象。同一试样可反复多次测量，结果重现性好。
（d） X射线荧光分析是一种物理分析方法，所以对在化学性质上属同一族的元素也能进行分析。可分析的元素范围从Na到U。WTH2000型的元素分析范围是Na到U，含量范围为10PPm～100％。因此该法已用于铜合金、镍合金中高含量Cu、Ni的分析.
（e）分析精密度高。WTH－2000型的分析精度达0.1％，检出限可达10ppm。
（f）制样简单，固体、粉末、液体样品等都可以进行分析。
缺点：
（a）难以做绝对分析，因此定量分析需要标样。
（b）对轻元素的灵敏度要低一些。
‘伍’ 抗荧光衰减封片剂（含DAPI）和不含DAPI的区别
抗荧光衰减封片剂是一种用于减缓荧光衰减的封片试剂。以甘油为基础，加入抗荧光衰减剂，有强烈的抗荧光衰减作用，用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片后，样品4℃或者-20℃避光可保存2-3周。在封片时用移液枪滴一滴抗荧光衰减封片液，盖上盖玻片就可以了。封片剂含细胞核DNA荧光染料DAPI，使实验操作更简便；封片剂干燥后会形成一层牢固的涂层，光学透明，非常便于后续观察、拍照与储存。索莱宝DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色，显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞。DAPI和双链DNA结合后，最大激发波长为360nm，最大发射波长为460nm。
‘陆’ 种元素量的现场驻地分析 波长色散X射线荧光光谱法
1 范围
本方法规定了土壤、水系沉积物和岩石试样中20种元素现场驻地的测定方法。
本方法适用于土壤、水系沉积物和岩石中的银、砷、金、钡、钙、钴、铬、铜、铁、锰、镍、铅、铷、锶、钛、钒、钨、钇、锌和锆量的现场驻地测定。本法检出限与测定范围见表1。
表1 测定范围［wB，μg/g］
方法检出限按下式计算：
区域地球化学勘查样品分析方法
式中：LD——检出限；m——1μg／g元素含量的计数率，1/［s·（μg·g-1）］；IB——背景的计数率，1/s；T——峰值和背景的总计数时间，s。
2 规范性文件
下列文件中的条款通过本方法的本部分的引用而成为本部分的条款
下列不注日期的引用文件，其最新版本适用于本方法。
GB／T 20001.4 标准编写规则 第4部分：化学分析方法。
GB／T 14505 岩石和矿石化学分析方法总则及一般规定。
GB／T 14506.1 硅酸盐岩石分析方法。
3 方法提要
试料采用粉末直接压片制样。用便携式波长色散X射线荧光光谱仪进行测定。各分析元素分别采用钼靶MoKα线的康普顿二次散射线作内标和经验系数法校正元素间的吸收-增强效应。
4 试剂
低压聚乙烯粉（北京助剂工厂）
5 仪器及器具
5.1 便携式波长色散X射线荧光光谱仪
俄罗斯SPECTROSCAN-U型便携式波长色散X射线荧光光谱仪：端窗钼靶X射线管（功率4W，高压 40kV，电流100μA）。
5.2 碎样机
BUS-2型便携式高速碎样机（贝利珠牌，地矿部龙江职工技协碎样机厂）。
5.3 压样机
FY-10型粉末压片机，油缸压力9.807×104Pa（天津市科器高新技术公司制造）。
5.4 模具
制样模具外径40mm，内径31mm。
5.5 筛
标准检验筛，孔径0.074mm及0.097mm（浙江上虞正阳纱筛厂制造）。
5.6 JPT型药物架盘天平
6 分析步骤
6.1 试料
试料粒径应小于0.074mm，在室温干燥后，装入小塑料瓶中备用。
试料量 称取4.0g试料，精确至0.1g。
6.2 校准试样
随同试料分析同类型的标准物质用于未知试样的校准。
6.3 测定
6.3.1 试样片的制备 用JPT-型药物架盘天平（5.6）称取试料（6.1），倒入模具内，用低压聚乙烯粉镶边垫底，在9.807×104Pa的压力下，压制成内径为31mm，外径为40mm的样片；取出样片，用彩笔在样片的白色低压聚乙烯边上写上样品编号或名称。测量时，只能拿样片的边缘，以避免X射线测量面的污染。
6.3.2 标准化样片的制备
6.3.2.1 为了校正仪器的漂移，先要制备标准化样品。标准化样品应包括分析元素和干扰元素，且各元素应有一定的含量，以减少计数的统计误差。标准化样品的物理及化学性质要稳定。所用的化学试剂为（化学纯或高于化学纯试剂）：
CuO、PbO、ZnO、As2O3、Ni203、RbCl、SrCO3、BaCO3、V2O5、Cr2O3、MnO2、Fe2O3、Cr2O3、CaCO3、AuCl、AgNO3和WO3。将这些试剂在105℃干燥2h，置干燥器中备用。
TiO2、ZrO2、Y2O3、Al2O3（基体）、SiO2（基体），在1000℃灼烧2h，置干燥器中备用。
6.3.2.2 标准化样片的配制（20.0000g）。在万分之一电子天平上称取CuO 0.0500g，PbO 0.0646g，ZnO 0.0498g，As2O30.0132g，Ni2O3 0.0282g，ZrO2 0.0270g，RbCl 0.0283g，SrCO3 0.0337g，BaCO3 0.0575g，V2O5 0.0357g，Cr2O3 0.0585g，MnO2 0.0633g，Fe2O3 1.4297g，Cr2O3 0.0028g，CaCO3 4.9946g，AuCl 0.0472g，AgNO3 0.0630g，WO3 0.0504g，Y2O3 0.0254g，TiO2 0.1668g，Al2O3 2.9133g和SiO2 9.7970g放于玛瑙钵中混匀，并按6.3.1条步骤制备成标准化样片。标准化样片中各元素含量见表2。
表2 标准化样品中各元素含量［wB，μg／g］
6.3.3 X射线荧光光谱法测量
6.3.3.1 测量条件。
表3 分析元素测量条件
X射线管电压为40kV，电流100μA，试样盒面罩直径30mm，空气光路，LiF200弯晶，封闭正比计数器。各分析元素的测量条件见表3。
6.3.3.2 背景校正。采用两点法扣背景。计算公式为（1）：
区域地球化学勘查样品分析方法
其中：IN——扣除背景以后的净强度；Ip——在谱线波长处测得的谱线加背景的总强度；IB1和IB2——分别为在谱线波长前后背景波长处测得的背景强度。
6.3.3.3 仪器漂移校正。通过测量标准化样片，校正仪器的漂移。
6.3.4 校准曲线的绘制
6.3.4.1 标准样品的制备。选用土壤GBW07404～07408、水系沉积物GBW07301～07312、硅酸盐岩石GBW07103～07114、合成硅酸盐标样GBW07705～07711、矿石金GBW070014～070015和GBW07297～07300一级标准物质按6.3.1步骤制备成标准样片后，按6.3.3.1测量条件测量各元素的X射线荧光光谱强度绘制校准曲线。标准样片的测量要在一次开机时间内完成；在测量之前，仪器要预热30min，以保证仪器稳定运行。校准曲线范围见表4。
表4 校准曲线范围［wB，μg/g］
6.3.4.2 校准与校正。标准、基体效应校准和谱线重叠干扰校正，使用综合数学校正模式进行回归。
计算公式为：
区域地球化学勘查样品分析方法
式中：Ci——标准物质分析元素i的标准值（或未知样品中分析元素i基体校正后的含量）；Ai——校准曲线常数，谱线重叠干扰校正系数或共存元素对分析元素的影响系数；Bi——校准曲线二次系数或交叉影响系数；A0和Fi——常数项；Ni——分析元素i的X射线强度；N——分析元素i，干扰元素k或共存元素j的X射线强度；Nnc——钼靶kα线的二次康普顿散射线的强度。
6.3.5 测量
6.3.5.1 输入分析元素的测量条件和标准物质中各元素的含量（标准值）。
6.3.5.2 测量标准样品。输入标准样品名称，测量标准物质中各分析元素的X射线荧光光谱强度。
6.3.5.3 测量标准化样品。为了克服仪器的漂移给分析带来的误差，要进行仪器漂移校正。采用强度校正法校正仪器漂移。在制作标准曲线时，同时测定标准化样片和分析标准样品，这时标准化样片中某元素分析线的强度为Is。用分析标准样品的强度制作校准曲线。当测定未知试样时，要先测量标准化样片，这时标准化样片中该元素分析线的强度为Im，则强度校正系数为α=Is／Im。未知试样中该元素的分析线强度乘上此校正系数α，得到标准化后的强度，用此强度计算未知试样的含量。
在正常情况下，每隔6h～8h测量一次标准化样片。若仪器环境条件较差或预热不充分，则要缩短测量标准化样片的时间间隔。
设置标准化样片名称，测量标准化样片中各分析元素的X射线强度。标准化样片中各分析元素的参考强度必须与标准物质在同一次开机中测量，以保证仪器漂移校正的有效性。
6.3.5.4 回归分析运算。用综合数学校正模式，对标准物质中各元素的X射线强度与其含量的关系进行回归计算，求出常数，A0，Bi和Fi，并保存在计算机定量分析软件中。
6.3.5.5 测量未知样品。
1）启动定量分析程序，测量标准化样片，进行仪器漂移校正。
2）检查样品即为标准样品或管理样品，用于检查仪器的稳定性和性能的变化。测量含量已知的检查样品。其结果应满足规范上制定的误差要求。
3）输入未知样品名称，测量未知样品。
7 分析结果的计算
根据未知样品的X射线强度，由计算机软件按公式（2）计算含量并打印出分析结果。
8 精密度
选用几个标准物质，各制备10个样片，按照各元素选定的测量条件进行测量。方法的精密度见表5。
表5 方法的精密度［n=10］
附加说明
本方法由中国地质调查局提出。
本方法由武汉综合岩矿测试中心技术归口。
本方法由中国地质科学院地球物理地球化学勘查研究所负责起草。
本方法主要起草人：李国会。
‘柒’ 求助 细胞免疫荧光的详细操作步骤
细胞免疫荧光的详细操作步骤
1，取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里，PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小，因此夹取的时候要小心。
2，4%多聚甲醛固定20分钟，PBS洗三遍。
3，0.2%Triton X 100通透10分钟，PBS洗三遍。
4， 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟，PBS洗三遍。
5.，一抗4度湿盒内过夜，也可37度2小时，感觉前者效果好，PBS洗三遍。
6，二抗室温2小时，或者37度1半小时，PBS洗三遍。
7，最好用DAPI染核，然后直接照荧光片。
8，蒸馏水洗掉PBS，甘油封片，指甲油封片子的四周。
‘捌’ 一种荧光棒，折一折会亮，一段时间后会灭掉，如何让它恢复能量
无法。
那种是用两种液体混合发亮的。折 的是里面有很薄的玻璃管。你切开看看咯。。扯断后发亮。
关于这种荧光棒的介绍：
荧光棒荧光棒 荧光棒发光原理
荧光棒中的化学物质主要由三种物质组成：过氧化物、酯类化合物和荧光染料。简单地说，荧光棒发光的原理就是过氧化物和酯类化合物发生反应，将反应后的能量传递给荧光染料，再由染料发出荧光。目前市场上常见的荧光棒中通常放置了一个玻璃管夹层，夹层内外隔离了过氧化物和酯类化合物，经过揉搓，两种化合物反应使得荧光染料发光。
发光特性
荧光棒的棒刚折亮时的亮度越高，发光时间就越短：
根据荧光棒的这个特性，我们把已经发光的荧光棒放在低温环境中（如：冰箱、冷柜），就可以抑制荧光棒中两种液体的化学反应，取出后可继续使用。
安全性
近几年来，儿童和年轻人把荧光棒当成一种时髦的玩艺儿，也曾有媒体说：“荧光棒所含成分为苯二甲酸二甲酯和苯二甲酸二丁酯，具有低毒性。如果不慎发生泄漏，被人体误吸或触碰，会造成恶心、头晕、麻痹甚至昏迷等伤害人体健康的现象。”对此，记者采访了专门研究荧光棒的化学专家、清华大学化学系物理化学研究所的赵福群，他表示，只要使用方法正确，荧光棒不会对人体造成太大伤害。
赵福群认为，由于荧光棒中的液体化学物质被聚乙烯（塑料）包装，所以不会对人体造成太大伤害。因为荧光棒所发出的光是靠化学反应激发染料发出的非放射性光，而不是由放射线激发染料发出的光，不会伤害人体。但赵福群也对时下有些人为追赶时髦，将荧光棒弄破，把里面的液体涂抹在身上的做法表示反对，因为荧光棒中的化学物质直接接触皮肤会对人体造成一定的损害。尤其注意不要让儿童误食。
之所以有观点认为荧光物质会伤害人体，是因为在有些夜光手表、矿井应急信号灯等中用的都是放射性物质，使染料在黑暗处发光，所以人们误认为荧光棒中也是运用了放射性物质，形成认识上的误差。消费者鉴别某夜光产品是否为放射性发光的办法是，放射性发光持续的时间比较长，并且光强度弱些；而非放射光持续的时间比较短。
注意事项
荧光棒中的液体不可食用，且具有一定的黏附性。如果泄漏：容易污染家具、地板、衣物、皮肤等，若出现以上情况须及时清洗；如果荧光棒中的液体进入眼睛中，须及时用清水洗净或就医。
因此，严禁用刀或剪刀弄破荧光棒的塑料管；严禁扭曲荧光棒，以防荧光棒中的液体泄漏。
运输和保存
荧光棒在运输和保存过程中，应避免高温暴晒和重力撞击或摔落。以免影响荧光棒的发光时间和亮度，以及避免弄破荧光棒中的玻璃管导致荧光棒提前发光以致使荧光棒失效。
http://ke..com/view/987112.html?wtp=tt
‘玖’ 免疫荧光染色时封闭的一步是干什么的
是封闭可以非特异性结合蛋白质的位点，也就是减少抗体（一抗和2抗都是蛋白质）的非特异性结合。
‘拾’ 免疫荧光染色能进行细胞平均荧光强度分析吗
(1)你的二抗是用fitc标记的，为避免荧光分解，分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/l
ph9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液，后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色，如果是用过氧化物酶做标记，就必须用3%h2o2以去除内源性过氧化物酶;2n盐酸需要使用，目的是使dna变性，让br抗体能够充分地与已经掺入的br结合。
做间接法免疫荧光染色，如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照，看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化，这个对照必须有，目的是看自发荧光，脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗，呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清，以pbs冲洗后，在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体，应呈阴性反应。